COREA DI HUNTINGTON: QUANDO È POSSIBILE DIAGNOSTICARE UNA VERA OMOZIGOSI? (RISPOSTA)

Questa è la risposta al quiz:

COREA DI HUNTINGTON: QUANDO SI PUÒ DIAGNOSTICARE UNA VERA OMOZIGOSI?

Se prima vuoi leggere la domanda, clicca qui.

Per la risposta, leggi qui sotto.

RISPOSTA

Il rilevamento di un unico picco all'esame fragment length (PCR) del gene HTT non è sufficiente per definire un probando come omozigote per quell'allele. La risposta corretta è quindi no, non è possibile dire con certezza se il paziente sia davvero omozigote per un allele da 10 ripetizioni e quindi non affetto da corea di Huntington. In effetti andrebbe eseguito un test per verificare che il probando non sia in realtà eterozigote composto per un allele da 10 triplette e un allele estremamente espanso, cioè con un numero di triplette talmente elevato da non poter essere rilevato dalla PCR (di solito con la semplice PCR si riescono ad amplificare alleli con un massimo di 115 ripetizioni). L'impatto sull'interpretazione clinica del risultato appare evidente, poichè un individuo omozigote per un allele da 10 ripetizioni va definito non affetto, mentre un individuo eterozigote composto per un allele da 10 ripetizioni e un allele con centinaia di triplette va definito affetto da corea di Huntington. I test che si possono eseguire per verificare un risultato apparentemente omozigote della PCR sono il Southern Blot o il Repeat Primed Assay (RPA). Esiste in ogni caso un modo per sospettare l'eterozigosi composta per un allele estremamente espanso anche senza eseguire il Southern Blot o lo RPA: la presenza del segno del porcospino (in inglese hedgehog). Il segno del porcospino non è altro che un piccola gobba di picchi (che mima per l'appunto il dorso del piccolo animale) che emerge dal rumore di fondo verso la fine del tracciato elettroforetico. Il porcospino è segno del fatto che i primer della PCR, sia pure a fatica, sono riusciti ad amplificare parzialmente anche l'allele con numerosissime ripetizioni e che il paziente è quindi un eterozigote composto per un allele non-patogeno e uno estremamente espanso. Taluni laboratori considerano la sola presenza dell'hedgehog addirittura un segno diagnostico primario, che non necessita nemmeno della conferma tramite Southern Blot o RPA.